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http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/40120| Título: | Identificação molecular de leveduras não-Saccharomyces isoladas de arbóreas nativas do Brasil |
| Título(s) alternativo(s): | Molecular identification of non-Saccharomyces yeast isolated from native trees in Brazil |
| Autor(es): | Nabhan, Barbara Selhorst |
| Orientador(es): | Bittencourt, Juliana Vitoria Messias |
| Palavras-chave: | Biotecnologia Micro-organismos Leveduras Prospecção Biotechnology Microorganisms Yeast Prospecting |
| Data do documento: | 2-Dez-2025 |
| Editor: | Universidade Tecnológica Federal do Paraná |
| Câmpus: | Ponta Grossa |
| Citação: | NABHAN, Barbara Selhorst. Identificação molecular de leveduras não-Saccharomyces isoladas de arbóreas nativas do Brasil. 2025. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Ponta Grossa, 2025. |
| Resumo: | A bioprospecção da biodiversidade fúngica é fundamental para o avanço da biotecnologia, em especial na busca por microrganismos não convencionais, que podem apresentar características filogenéticas superiores em condições de estresse e ainda pouco estudadas quando comparadas às linhagens comerciais de Saccharomyces cerevisiae. O presente trabalho teve como objetivo principal a identificação molecular de oito isolados de leveduras não-Saccharomyces previamente isoladas da filoesfera de arbóreas nativas do Brasil, incluindo jabuticabeira, butiazeiro, amoreira, nespereira, serigueleira e gabirobeira. Os isolados que estão depositados na Coleção Microbiológica da Rede Paranaense (CMRP), laboratório da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (UTFPR), campus Ponta Grossa, onde foram reativadas em meio de cultura YPD, para verificação da pureza dos isolados e análise da macro e micromorfologia. Para o estudo molecular, inicialmente realizou-se a extração do DNA genômico, seguida da amplificação de regiões conservadas e variáveis do DNA ribossomal (rDNA), com os primers V9G e LS266 para a região ITS (Internal Transcribed Spacer) e os primers NL1 e NL4 para a região D1/D2 do 28S. A identificação taxonômica a nível de espécie foi alcançada com sequenciamento Sanger dos amplicons purificados, seguida pela análise de similaridade por BLAST no NCBI (National Center for Biotechnology Information) e confirmação por meio de construção de uma árvore filogenética multilocus. A análise dos BLASTs permitiram a identificação de três grupos taxonômicos distintos, todos com um potencial biotecnológico notório, sendo duas linhagens de Lodderomyces elongisporus (100% de identidade), uma linhagem de Meyerozyma caribbica (100% de identidade) e cinco linhagens pertencentes ao gênero Torulaspora, que apresentaram divergência a nível de espécie entre os marcadores ITS (T. delbrueckii) e 28S (T. pretoriensis), que foi posteriormente avaliado e confirmado em árvore filogenética multilocus como T. pretoriensis. As espécies identificadas, representam recursos genéticos com grande potencial para aplicações industriais, abrangendo a produção de enzimas (celulases e pectinases), bioenergia e a modulação do perfil organoléptico em fermentações de alto valor agregado, reforçando a importância da bioprospecção de microrganismos não convencionais de arbóreas nativas brasileiras. |
| Abstract: | The bioprospection of fungal biodiversity is fundamental for the advancement of biotecnology, especially in the Search for non-conventional microorganisms, that may present superior phylogenetic characteristics under stress conditions and that remain poorly studied compared to comercial strains of Saccharomyces cerevisiae. The main objective of this study was the molecular identification of eight non-Saccharomyces yeast strains previously isolated from the phyllosphere of native Brazilian arboreal species, including jabuticaba, butiá, mulberry, loquat, hog plum tree, and gabiroba. The isolates deposited in the the Microbiological Collection of the Paraná Network (CMRP), a laboratory at the Federal Technological University of Paraná (UTFPR), Ponta Grossa campus, where they were reactivated in YPD culture medium for verification of isolate purity and analysis of macro and micromorphology. For the molecular study, genomic DNA extraction was first performed, followed by the amplification of conserved and viable regions of ribossomal DNA (rDNA) using primers V9G and LS266 for the ITS (Internal Transcribed Spacer) region and primers NL1 and NL4 for the D1/D2 region of the 28S rDNA. Taxonomic identification at the species level was achieved by Sanger sequencing of the purified amplicons, followed by smilarity analysis using BLAST on the NCBI (National Center for Biothecnology Information) database and confirmation through the construction of a multilocus phylogenetic tree. The analysis of BLAST allowed the identification of three distinct taxonomic groups, all with notable biotechnological potential: two strains of Lodderomyces elongisporus (100% identity), one strain of Meyerozyma caribbica (100% identity), and five strains belonging to the genus Torulaspora, which presented species-level divergence between the ITS (T. delbrueckii) and 28S (T. pretoriensis) markers, which was subsequently evaluated and confirmed in the multilocus phylogenetic tree as being T. pretoriensis. The identified species represent genetic resources with great potencial for industrial applications, including the prodution of enzymes (celulases and pectinases), bioenergy, and the modulation of the organoleptic profile in high-value fermentations, reforcing the importance of bioprospecting non-convencional microrganisms from native Brazilian arboreal species. |
| URI: | http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/40120 |
| Aparece nas coleções: | PG - Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia |
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