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Título: Óleos essenciais no controle do fungo Sclerotinia sclerotiorum (LIB.) de Bary in vitro
Título(s) alternativo(s): Essential oils in the control of fungus Sclerotinia sclerotiorum (LIB.) de Bary in vitro
Autor(es): Siega, Thayllane de Campos
Orientador(es): Mazaro, Sérgio Miguel
Palavras-chave: Fungos do solo
Essências e óleos essenciais
Pragas - Controle
Soil fungi
Essences and essential oils
Pragas - Controle
Data do documento: 15-Fev-2018
Editor: Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Câmpus: Pato Branco
Citação: SIEGA, Thayllane de Campos. Óleos essenciais no controle do fungo Sclerotinia sclerotiorum (LIB.) de Bary in vitro. 2018. 95 f. Dissertação (Mestrado em Agronomia) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Pato Branco, 2018.
Resumo: A Sclerotinia sclerotiorum é um fungo que causa a doença conhecida por podridão branca da haste ou mofo branco. Em função da capacidade de sobrevivência do fungo no solo através de estruturas especializadas denominadas escleródios e das condições ambientais favoráveis à sua germinação, é indispensável a utilização de medidas integradas considerando o controle quı́mico e manejo cultural em seu controle. O objetivo do trabalho foi verificar através do tratamento (efeito volátil e tratado) de escleródios com 17 diferentes óleos essenciais, sobre a germinação miceliogênica e carpogênica de S. sclerotiorum, bem como avaliar de maneira mais especializada os óleos de Melaleuca alternifolia, Eugenia uniflora e Casearia sylvestris frente à possı́veis alterações morfológicas ocorridas nas hifas através do uso de microscopia eletrônica de varredura (MEV), microscopia óptica (MO) e análise por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/EM). A germinação miceliogênica foi feita em meio BDA e a incubação em câmara de crescimento do tipo BOD a 18 ◦ C e fotoperı́odo de 12 horas. Os óleos essenciais (15 µl) foram aplicados em papel filtro autoclavado (1 cm2 ), fixado na R, e os escleródios no centro da placa contendo BDA. Para tampa superior da placa de Petri R por 2 minutos, dispostos da o efeito tratado com 15 µl + 2 ml de água e 1 gota de Tween mesma forma que o tratamento volátil. As avaliações das germinações foram realizadas às 24, 48, 72 e 96 horas após o inı́cio da incubação. A germinação carpogênica foi induzida em R solo esterilizado acondicionado em Gerbox e a incubação em câmara de crescimento com temperatura de 18 C ± 2 C, fotoperı́odo de 12 horas e umidade do solo a 100% da capacidade de campo, utilizando dosagem de 30 µl de óleo essencial efeito volátil no papel filtro para R 15 escleródios e efeito tratado com 30 µl+ 2 ml de água e 1 gota de Tween 80 por 2 minutos para 60 escleródios. O delineamento experimental para os dois experimentos, foi o inteiramente casualizado com quatro repetições por tratamento. As análises cromatográficas foram realizadas pela Embrapa Floresta utilizando injeção automática. Foram feitas as imagens no microscópio eletrônico de varredura Hitachi TM 3000, operando em 15 kV, com ampliações de 200, 800 e 1000x. Em microscópio ótico Zeiss modelo Primo Star, acoplado a câmera Axiocam 105 color e ao Software Zen 2.0 lite (blue edition) foram realizadas as imagens das estruturas do fungo. A produção de enzimas extracelulares do fungo também foram realizadas, para amilase, protease, celulase e esterase. Conclui-se que os 17 óleos essenciais utilizados nesse estudo, apresentam potencial de controle do fungo S. sclerotiorum, e sugere-se que a ação fungicida desses óleos essenciais pode estar ligada aos seus componentes majoritários, causando um estı́mulo agressor nas estruturas do fungo, dessa forma as células romperam seu equilı́brio homeostático e sofrem um processo regressivo que pode levando a morte celular.
Abstract: Sclerotinia sclerotiorum is a fungus that causes the disease known as white stem rot or white mold. Due to the survival capacity of the fungus in the soil through specialized structures called sclerotia and the environmental conditions favorable to its germination, it is indispensable to use integrated measures considering the chemical control and cultural management in its control. The goal of this work was to verify the treatment (volatile and treated efects) of sclerotia with 17 different essential oils, on the myceliogenic and carpogenic germination of S. sclerotiorum, as well as to evaluate in a more specialized way the oils of Melaleuca alternifolia, Eugenia uniflora and Casearia sylvestris in the face of possible morphological changes in the hyphae through the use of scanning electron microscopy (SEM), optical microscopy (OM) and gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC/MS). Myceliogenic germination was done in PDA medium and incubation in a BOD type growth chamber at 18 C and 12 hour photoperiod. The essential oils (15 ml/mL) were applied on autoclaved filter paper (1 cm2), attached to the top lid of the Petri R plate, and sclerotia in the center of the PDA - containing plate. For the treated effect with 15 ml/ml + 2 ml of water and 1 drop of Tween R for 2 minutes, arranged in the same manner as the volatile treatment. Germination assays were performed at 24, 48, 72 and 96 hours after the start of incubation. Carpogenic germination was induced in sterilized conditioned soil in Gerbox R and incubation in a growth chamber with a temperature of 18 °C °2 °C, 12 hour photoperiod and soil moisture at 100% field capacity, using dosage of 30 ml/ml essential oil on volatile effect on filter paper for 15 sclerotia and treated effect with 30 ml/ml + 2 ml of water and 1 drop of Tween R for 2 minutes for 60 sclerotia. The experimental design for the two experiments was the completely randomized with four replicates per treatment. The chromatographic analyzes were performed by Embrapa Floresta using automatic injection. The images were taken on the Hitachi TM 3000 scanning electron microscope, operating at 15 kV, with magnifications of 200, 800 and 1000x on Zeiss optical microscope Primo Star model, coupled with Axiocam 105 color camera and the software Zen 2.0 lite (blue edition) the images of the structures of the fungus were carried out. The production of extracellular enzymes from the fungus was also performed, for anda amilase, protease, celulase e esterase. It is concluded that the 17 essential oils used in this study have potential control of the fungus S. sclerotiorum, and it is suggested that the fungicidal action of these essential oils may be linked to its major components, causing an aggressive stimulus in the structures of the fungus, in this way the cells broke their homeostatic equilibrium and undergo a regressive process that can leading to cell death.
URI: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/3069
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