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Título: Avaliação da atividade antimicrobiana de nanopartículas de prata biossintetizadas pelo fungo Aspergillus niger
Título(s) alternativo(s): Evaluation of antimicrobial activity of silver nanoparticles biosynthesized by the Aspergillus niger fungi
Autor(es): Ferrazoli, Flávia Satie Noguti
Orientador(es): Eising, Renato
Palavras-chave: Biossíntese
Nanotecnologia
Bioquímica
Biosynthesis
Nanotechnology
Biochemistry
Data do documento: 28-Nov-2019
Editor: Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Câmpus: Toledo
Citação: FERRAZOLI, Flávia Satie Noguti. Avaliação da atividade antimicrobiana de nanopartículas de prata biossintetizadas pelo fungo Aspergillus niger. 2019. Trabalho de Conclusão de Curso (Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Toledo, 2019.
Resumo: A proposta do trabalho a seguir diz respeito a síntese de nanopartículas de prata através de métodos biológicos, mediada pelo fungo Aspergillus niger, já amplamente conhecido pela sua capacidade de promover a redução de alguns metais de maneira esponânea. A biossíntese pode ser dividida em duas etapas, de obtenção das células do fungo e de redução do nitrato de prata. A primeira etapa consistiu no crescimento do fungo em suas condições ideais em meio sólido, seguida pela separação dos esporos e crescimento do fungo em meio líquido, o que resultou no filtrado de células. O filtrado de células foi então usado para a segunda etapa, onde foi feita uma solução com adição de nitrato de prata, que sofreu redução e resultou nas nanopartículas de prata, identificada por uma mudança visível na coloração da solução, de branca turva a tons de marrom. A caracterização das nanopartículas foi feita através de espectroscopia UV-vis e análise em microscopia eletrônica de transmissão, que permitiram observar o formato e o tamanho das nanopartículas obtidas. Para a verificação do efeito bactericida, diferentes colônias de bactérias foram incubadas com a presença de poços contendo diferentes concentrações da suspensão coloidal, resultando na formação de halos conforme a atividade antimicrobiana observada. Os resultados das concentrações obtidos neste trabalho foram parecidos para AgNP1 e AgNP3, apresentando concentrações de prata de 571,6263 mgL-1 e 584,3510 mgL-1 respectivamente, enquanto para AgNP2 foi obtida uma concentração de 406,9420 mgL-1. Todas as amostras apresentaram bandas entre 400 e 500 nm, como espera-se para nanopartículas de prata, com absorbâncias entre 0,4 e 0,5 abs. O tamanho das nanopartículas biossintetizadas está de acordo com dados observados na literatura, variando de 37,5 a 47,3 nm. Para os testes biológicos, tem-se resultados similares de diâmetro dos halos encontrados no teste de difusão de poços, enquanto a CIM apresentou melhor resultado para a Clostridium perfringens, na condição AgNP3, com concentração inibitória mínima de 36,5220 mgL-1. Para a CBM, as menores concentrações foram para a diluição de 12,5% das suspensões, condizendo com os resultados obtidos através da CIM.
Abstract: The following work proposes synthesis of silver nanoparticles through biological methods, mediated through Aspergillus niger fungi, an organism widely known for its spontaneous metal reduction capacity. The biosynthesis can be segmented in two major processes, obtention of the fungal cells and silver nitrate reduction. The first process consisted of cultivating the fungus on its optimal conditions, separating the spores originated from the solid culture and growing the fungus in liquid media, resulting in the cell filtrate. The cell filtrate was then used for the second step of this process, adding a silver nitrate solution to the cell filtrate, promoting the nitrate’s reduction, originating the silver nanoparticles, observed through a change in the solution’s color, from a turbid white to shades of brown. The characterization of the nanoparticles was made through UV-vis spectroscopy and transmission electronic microscopy, methods that allow further analysis of the nanoparticles’ shape and size. For the verification of the suspension’s anti-bacterial effects, different species of bacteria were submitted to the well plate method, which consists on cultivating the colonies on a Petri plate with wells containing different concentrations of the colloidal suspension, resulting on hollow ring zones around the disks, indicating the anti-microbial activity. In this paper, the obtained results were similar for the AgNP1 and AgNP3 conditions, with silver concentrations equivalent to 571,6263 mgL-1 and 584,3510 mgL-1 respectively, while for AgNP2 a concentration of 406,9420 mgL-1 was obtained. All samples presented bands between 400 and 500 nm on UV-vis spectrophotometry, as expected for silver nanoparticles, with absorbances between 0,4 and 0,5 abs. The biosynthesized nanopartciles’ size is compatible with the literature, ranging from 37,5 to 47,3 nm. For the biological tests, there’s a similar result on the halo’s diameter observed on the well diffusion test, while the MIC presented a better result for Clostridium perfringens on AgNP3 conditions, with a minimal inhibitory concentration of 36,5220 mgL-1. For MBC, the best concentrations were obtained from the dilutions of 12,5% of the suspensions, matching with the MIC results.
URI: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/23898
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