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http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/12152| Título: | Avaliação do potencial inseticida e metabolômica microbiana de extratos orgânicos de isolados de fungos Entomopatogênicos metarhizium spp. |
| Autor(es): | Morais, Karoline Oliveira |
| Orientador(es): | Daniel, Juliana Feijó de Souza |
| Palavras-chave: | Pragas - Controle biológico Fungos entomopatogênicos Metabólitos Pests - Biological control Entomopathogenic fungi Metabolites |
| Data do documento: | 21-Out-2019 |
| Editor: | Universidade Tecnológica Federal do Paraná |
| Câmpus: | Londrina |
| Citação: | MORAIS, Karoline Oliveira. Avaliação do potencial inseticida e metabolômica microbiana de extratos orgânicos de isolados de fungos Entomopatogênicos metarhizium spp. 2019. 54 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação) - Universidade Tecnológica do Paraná, Londrina, 2019. |
| Resumo: | A expansão de áreas cultivadas no Brasil, associada a condições climáticas e uso indiscriminado de agrotóxicos selecionou insetos pragas resistentes. O percevejo Dichelops melacanthus (Dallas, 1851) (hemiptera: pentatomidae) causa prejuízos ao crescimento culturas de milho, diminuindo a produção e causando prejuízos ao crescimento e sobrevivência das mesmas, diminuindo o número de plantas por área cultivada. Alguns fungos sintetizam metabólitos secundários e enzimas que atuam como agentes no controle biológico de pragas na agricultura. A análise metabolômica é o estudo dos metabólitos secundários com baixas massas moleculares produzidas por fungos e outros microrganismos. Uma das ferramentas analíticas que permitem essa análise é a cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas, que possibilita análise tanto quantitativa como qualitativa, fornecendo informações estruturais das moléculas, a partir de dados de massas. Os objetivos deste trabalho foram realizar um teste bioinseticida contra o percevejo D. melacanthus e identificar o possível gênero dos seis isolados fúngicos através da análise metabolômica. Seis isolados foram obtidos de insetos Spheciformes sp. (Vespa), Anthophila sp. (Abelha), Formica sp. (Formiga), Amblytelus sp (Besouro). Os extratos orgânicos produzidos pelos isolados foram extraídos utilizando solvente orgânico acetato de etila e metanol. Para realização do teste bioinseticida os percevejos encontravam-se no quinto instar de crescimento. Foram realizados 14 tratamentos com 5 repetições. Cada tratamento foi realizado em caixa acrílica contendo 5 percevejos, com uma dieta restrita, e umidade média de 60 % por caixa em sala climatizada com fotoperíodo de 14 horas. Os tratamentos foram borrifados sobre cada uma das caixas, de acordo com o respectivo tratamento. Após o décimo dia de análise foi realizado o teste de Tukey para análise da mortalidade. A análise dos metabólitos foi obtida de acordo com a massa molecular obtida em UHPLC (Ultra High Pressure Liquid Chromatography) na concentração de 0,1 mg/ml, a partir dos extratos fúngicos. Foram identificadas morfologicamente esporos fúngicos pertencentes ao gênero Aspergillus sp. O teste inseticida não apresentou dados significativos de mortalidade a partir dos extratos e esporos dos isolados fúngicos, devido à média de mortalidade das testemunhas e controle serem próximas aos resultados dos demais tratamentos. Na análise metabolômica, identificou-se 24 metabólitos sintetizados por fungos, sendo 17 destruxinas e 7 aflatoxinas produzidas por Metarhizium e Aspergillus respectivamente. A identificação de fungos por essas análises foram complementares, além de permitir a criação de um banco de dados de moléculas fúngicas usando a espectrometria de massas. |
| Abstract: | The expansion of cultivated areas in Brazil, associated with climatic conditions and indiscriminate use of pesticides, selects insect resistant pests. The stink bug Dichelops melacanthus (Dallas, 1851) (hemiptera: pentatomidae) causes damage to the growth of maize crops, slowing yields and impairing their growth and reproduction by decreasing the number of plants per cultivated area. Some fungi synthesize secondary metabolites and enzymes that act as agents without biological pest control in agriculture. A metabolic analysis is the study of secondary metabolites with low molecular masses produced by fungi and other microorganisms. One of the analytical tools that allow this analysis is the liquid chromatography coupled to mass spectrometry, which enables both quantitative and qualitative analysis, providing structural information of molecules from mass data. The objectives of this work were to perform a bioinsecticide test against the D. melacanthus stink bug and to identify the possible genus of the six fungal isolates through the metabolomic analysis. Six isolates were obtained from insects Spheciformes sp. (Wasp), Anthophila sp. (Bee), Formica sp. (Ant), Amblytelus sp (Beetle). The organic extracts produced by the isolates were extracted using organic solvent ethyl acetate and methanol. To perform the bioinsecticide test the bed bugs were in the fifth instar of growth. There were 14 treatments with 5 repetitions. Each treatment was carried out in an acrylic box containing 5 bed bugs, with a restricted diet, and average humidity of 60% per box in a 14 hour photoperiod. The treatments were sprayed on each box according to the respective treatment. After the tenth day of analysis, the Tukey test for mortality analysis was performed. The metabolites analysis was obtained according to the molecular mass obtained in UHPLC (Ultra High Pressure Liquid Chromatography) at a concentration of 0.1 mg / ml, from the fungal extracts. Morphologically identified fungal spores belonging to the genus Aspergillus sp. The insecticide test did not present significant mortality data from fungal isolates extracts and spores, due to the average mortality of the controls and control are close to the results of the other treatments. In the metabolomic analysis, 24 metabolites synthesized by fungi were identified, being 17 destruxins and 7 aflatoxins produced by Metarhizium and Aspergillus respectively. The identification of fungi by these analyzes were complementary, besides allowing the creation of a database of fungal molecules using mass spectrometry. |
| URI: | http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/12152 |
| Aparece nas coleções: | LD - Engenharia Ambiental |
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