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Título: Obtenção de glicosaminoglicanos de escamas de tilápia (Oreochromis niloticus)
Título(s) alternativo(s): Obtaining glycosaminoglycans from tilapia scales (Oreochromis niloticus)
Autor(es): Moura, Heloisa Cristina de
Orientador(es): Alfaro, Alexandre da Trindade
Palavras-chave: Glicosaminoglicanos
Tilápia (Peixe)
Pesca - Subprodutos
Sulfato de dermatan
Glycosaminoglycans
Tilapia
Fisheries - By-products
Dermatan sulphate
Data do documento: 29-Mai-2020
Editor: Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Câmpus: Londrina
Citação: MOURA, Heloisa Cristina de. Obtenção de glicosaminoglicanos de escamas de tilápia (Oreochromis niloticus). 2020. 68 f. Dissertação (Mestrado em Tecnologia de Alimentos) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Londrina, 2020.
Resumo: Glicosaminoglicanos (GAGs) são polissacarídeos aniônicos, compostos por unidades dissacarídica repetitivas de hexosamina, ácido urônico ou galactose. Suas propriedades estruturais e biológicas estão associadas à densidade de cargas negativas na molécula. Há relatos dessas estruturas estarem presentas nas mais variadas espécies, inclusive nos peixes. A produção de pescado tem alcançado números cada vez mais expressivos e o Brasil tem se destacado no cenário internacional. A espécie de maior volume de produção no país é a tilápia, e o Paraná é o estado com maior volume de produção nacional. Atrelado a esse aumento de produção e consumo, está à geração de subprodutos. As escamas representam grade parte desse material quando se considera o volume de tilápia que tem sido processado. Alternativas para o aproveitamento efetivo das escamas representam hoje, um dos maiores desafios para as plantas processadoras. O trabalho teve como objetivo, utilizar escamas de tilápia como matéria prima para a extração, isolamento e caracterização de GAGs. A extração foi realizada por hidrolise enzimática com papaína, a uma temperatura de 60 °C, durante 14 dias. Após a extração realizou-se a purificação em coluna de troca iônica. As frações obtidas com a purificação foram agrupadas de acordo com os perfis obtidos pelas análises de condutividade elétrica e pelas determinações de ácido urônico e GAGs sulfatados. De todas as frações obtidas cromatograficamente, foram agrupadas seis novas frações, destas, as que apresentaram picos majoritários nas determinações anteriormente citadas, foram caracterizadas por eletroforese em gel de agarose. Os resultados de eletroforese e ressonância magnética nuclear (RMN) indicaram a presença de GAGs sulfatados na amostra. Com base nos espectros de RMN, a fração V (F- V) apresentou maior grau de pureza, possibilitando desse modo a identificação de sinais característicos para GAGs sulfatados. Foi encontrada uma mistura de sulfato de condroitina 4 (SC4) e sulfato de condroitina 6 (SC6). Essa fração foi testada quanto ao grau de substituição (GS) por grupamentos sulfato e apresentou GS de 0,146. A F – V apresentou atividade anticoagulante, sendo a ação mais efetiva em maiores concentrações. Quando testada na presença na presença de protamina, a F – V apresentou um efeito pró-anticoagulante. A fração apresentou efeito citotóxico/antitumoral frente às células metabolizadoras, derivadas de hepatoma de Rattus norvegicus, demonstrando o seu potencial de aplicação para essa finalidade. Assim, a extração de sulfato de condroitina de escamas de tilápia pode ser uma alternativa para a destinação desse subproduto, gerando benefícios econômicos, sociais e ambientais.
Abstract: Glycosaminoglycans (GAGs) are anionic polysaccharide composed of repetitive disaccharide units of hexosamine, uronic acid or galactose. Its selected and biological properties are associated with the density of negative charges in the molecule. There are reports of these structures present in the most varied species, including fish. The production of fish has reached increasingly expressive numbers and Brazil stands out on the international scene. A species with the highest production volume in the country is tilapia, and Paraná is the state with the highest national production volume. Linked to this increase in production and consumption, it is the generation of by-products. The scales represent the part of this material when considering the volume of inclination that was processed. The alternatives for the effective use of the scales represent today, one of the biggest challenges for the processing plants. The work aimed to use tilapia scales as raw carried out by enzymatic hydrolysis with papain, at a temperature of 60 °C, for 14 days. After extraction, the ion exchange column was purified. The fractions obtained with the purification were grouped according to the profiles obtained by the electrical conductivity analyzes and by the determinations of uronic acid and sulfated GAGs. Of all fractions obtained chromatographically, six new fractions were grouped, of these those that showed major peaks in the determinations previously mentioned, were characterized by electrophoresis in agarose gel. The results of electrophoresis and nuclear magnetic resonance (NMR) indicated the presence of sulfated GAG´s in the sample. Based on the NMR spectra, the V fraction (F – V) showed a higher degree of purity, thus enabling the identification of characteristic signals for sulphated GAGs. A mixture of chondroitin sulfate 4 (SC4) and chondroitin sulfate 6 (SC6) was found. This fraction was tested for the degree of substitution (GS) by sulphate groups and presented as GS of 0,146. F –V showed anticoagulant activity, being the most effective actions in higher concentrations. When tested in the presence of protamine, F- V a had a pro-anticoagulant effect. The fraction showed a cytotoxic/antitumor effect against metabolizing cells, derived from Rattus norvegicus hepatoma, thus demonstrating its potential for application for this purpose. The extraction of chondroitin sulfate from tilapia scales can be an alternative for the destination of this by-product, generation economic, social and environmental benefits.
URI: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/5068
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