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Título: Bioprospecção de bactérias do gênero Lactobacillus presentes no leite cru da microrregião de Toledo-PR visando valorização de sua indústria queijeira
Título(s) alternativo(s): Bioprospection of bacteria of the genre Lactobacillus present in raw milk from the microrregion of Toledo-PR with aim to increase the value of its cheese industry
Autor(es): Silva, Ana Luisa Kirsten da
Orientador(es): Eising, Renato
Palavras-chave: Queijo - Indústria
Indicações geográficas (Marcas de origem)
Desenvolvimento rural
Cheese industry
Marks of origins
Rural development
Data do documento: 18-Dez-2023
Editor: Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Câmpus: Toledo
Citação: SILVA, Ana Luisa Kirsten da. Bioprospecção de bactérias do gênero Lactobacillus presentes no leite cru da microrregião de Toledo-PR visando valorização de sua indústria queijeira. 2023. Dissertação (Mestrado em Tecnologias em Biociências) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Toledo, 2023.
Resumo: Este estudo interdisciplinar aborda a bioprospecção de cepas de Lactobacillus no leite cru da Microrregião de Toledo, Paraná, visando valorizar a indústria queijeira local. Ressalta-se que este trabalho é parte integrante do projeto de queijos finos do Biopark, e objetiva elevar a bacia leiteira da região a partir da bioprospecção de cepas de Lactobacillus nativas visando sua aplicação na produção de queijos. Ao considerar as Indicações Geográficas (IG), busca-se aprimorar a qualidade dos queijos e contribuir para o desenvolvimento econômico e cultural regional. A ausência de uma indicação geográfica específica para os queijos na região abre espaço para a identificação da microbiota presente em amostras de leite produzidas localmente. O desenvolvimento do trabalho incluiu isolar, avaliar morfologicamente e bioquimicamente, selecionar e identificar geneticamente cepas de Lactobacillus com potencial para a produção de queijo de amostras de leite cru obtidas em dez produtores diferentes. Este estudo não apenas contribui para a valorização de produtos locais, mas também oferece uma perspectiva sustentável para o desenvolvimento rural, alinhado com as tendências globais de valorização da origem e preservação de práticas alimentares tradicionais. A metodologia abrangeu diversas análises microbiológicas, bioquímicas e genéticas para caracterizar as cepas isoladas, como teste de catalase, coloração de Gram, teste de motilidade, teste de fermentação de lactose, testes de tolerância a 1%, 3%, 5% e 7% (m/v) de NaCl, teste de produção de CO2 a partir da glicose, teste de tolerância a temperaturas de 15°C, 40°C e 45°C e teste de fermentação de açúcares. De acordo com os resultados obtidos, dos 250 microrganismos inicialmente isolados, 110 mostraram crescimento em ágar MRS nas condições utilizadas, e possíveis explicações para a ausência de crescimento foram discutidas. O processo de seleção resultou em 68 cepas catalasenegativas, em seguida em 55 Gram-positivas e sequencialmente em 41 caracterizadas como bacillus. O teste de motilidade reduziu para 28 cepas, dentre as quais 26 foram capazes de fermentar a lactose. Todas as 26 cepas foram capazes de tolerar 1% de NaCl, mas esse número reduziu para 22 em 3% e para 13 em 5%. Das 13, oito apresentaram fermentação eficiente em 7% e as outras 5 apresentaram uma fermentação fraca. As 13 cepas também apresentaram características homofermentativas, ou seja, capazes de formar apenas ácido lático, sem outros subprodutos, ideais dentro deste contexto. Testes subsequentes incluíram tolerância a diferentes temperaturas e açúcares a fiz de realizar uma melhor caracterização metabólica das cepas selecionadas. Ao final, verificou-se que todas as 13 cepas apresentaram resultados favoráveis, destacando-se a viabilidade para uso na indústria queijeira. Embora os testes tenham possibilitado inferências sobre possíveis espécies, a identificação exige análises moleculares, dada a diversidade intrínseca das cepas. Por fim, destaca-se que os resultados do presente estudo contribuem para a seleção de cepas de Lactobacillus promissoras para a produção de queijo na Microrregião de Toledo-PR, bem como suas possíveis aplicações industriais, ressaltando a importância de investigações moleculares mais aprofundadas para uma caracterização completa.
Abstract: This interdisciplinary study addresses the bioprospecting of Lactobacillus strains in raw milk from the Microregion of Toledo, Paraná, aiming to enhance the local cheese industry. It should be noted that this work is an integral part of the Biopark's fine cheese project, and aims to improve the region's dairy basin by bioprospecting native Lactobacillus strains with a view to their application in cheese production. When considering Geographical Indications (GI), the aim is to improve the quality of cheeses and contribute to regional economic and cultural development. The absence of a specific geographical indication for cheeses in the region opens up space for the identification of the microbiota present in locally produced milk samples. The development of the work included isolating, morphologically and biochemically evaluating, selecting and genetically identifying strains of Lactobacillus with potential for cheese production from raw milk samples obtained from ten different producers. This study not only contributes to the appreciation of local products, but also offers a sustainable perspective for rural development, aligned with global trends in valuing the origin and preservation of traditional food practices. The methodology included several microbiological, biochemical and genetic analyzes to characterize the isolated strains, such as catalase test, Gram staining, motility test, lactose fermentation test, tolerance tests at 1%, 3%, 5% and 7% (m/v) of NaCl, CO2 production test from glucose, tolerance test at temperatures of 15°C, 40°C and 45°C and sugar fermentation test. According to the results obtained, of the 250 microorganisms initially isolated, 110 showed growth on MRS agar under the conditions used, and possible explanations for the lack of growth were discussed. The selection process resulted in 68 catalase-negative strains, then 55 Gram-positive ones and sequentially 41 characterized as bacillus. The motility test reduced it to 28 strains, of which 26 were capable of fermenting lactose. All 26 strains were able to tolerate 1% NaCl, but this number reduced to 22 at 3% and to 13 at 5%. Of the 13, eight showed efficient fermentation at 7% and the other 5 showed weak fermentation. The 13 strains also presented homofermentative characteristics, that is, capable of forming only lactic acid, without other byproducts, ideal within this context. Subsequent tests included tolerance to different temperatures and sugars and carried out a better metabolic characterization of the selected strains. In the end, it was found that all 13 strains presented favorable results, highlighting their viability for use in the cheese industry. Although the tests have enabled inferences about possible species, identification requires molecular analysis, given the intrinsic diversity of the strains. Finally, it is highlighted that the results of the present study contribute to the selection of promising Lactobacillus strains for cheese production in the Microregion of Toledo-PR, as well as their possible industrial applications, highlighting the importance of more in-depth molecular investigations for a complete characterization.
URI: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/34434
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