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Título: Revisão acerca da aplicação da técnica “Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus Polymerase Chain Reaction” (ERIC-PCR) em genotipagem de cepas bacterianas isoladas de mastite bovina, como contribuição ao desenvolvimento de estratégias efetivas de profilaxia
Título(s) alternativo(s): Review on the application of the “Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus Polymerase Chain Reaction” (ERIC-PCR) technique in genotyping of bacterial strains isolated from bovine mastitis, as a contribution to the development of effective prophylaxis strategies
Autor(es): Carmo, Taynara Michelato do
Orientador(es): Vítola, Francisco Menino Destéfanis
Palavras-chave: Mastite
Diagnóstico bacteriológico
Reação em cadeia de polimerase
Mastitis
Diagnostic bacteriology
Polymerase chain reaction
Data do documento: 2-Abr-2024
Editor: Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Câmpus: Dois Vizinhos
Citação: CARMO, Taynara Michelato do. Revisão acerca da aplicação da técnica “Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus Polymerase Chain Reaction” (ERIC-PCR) em genotipagem de cepas bacterianas isoladas de mastite bovina, como contribuição ao desenvolvimento de estratégias efetivas de profilaxia. 2024. Monografia (Especialização em Biologia Molecular) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Dois Vizinhos, 2024.
Resumo: A mastite bovina é uma inflamação da glândula mamária, causada principalmente por bactérias, que acometem vacas leiteiras ocasionando danos ao tecido mamário, ao produtor, ao leite bovino e, até mesmo, causando problemas à nível de saúde pública. A mastite bovina vem sendo apontada como uma das principais causas da baixa produção do leite bovino em gado leiteiro, acarretando aumento das despesas com médico veterinário, descarte precoce do leite, e descarte do animal, à depender do nível da infecção; resultando em um alto índice de perdas econômicas na indústria leiteira. Pode-se classificar quanto às suas formas de apresentação no animal, de forma clínica ou subclínica, e ambiental. Na forma clínica, é notável os sintomas físicos, sejam eles no quarto mamário do animal ou no leite; já a forma subclínica, apresenta-se com ausência de alterações visuais na glândula mamária, o que pode agravar o quadro do animal com mais facilidade, já que apresenta-se dessa forma silenciosa, para identificação da mastite subclínica, acaba sendo necessária a coleta de amostras para cultura de microrganismos ou contagem de células somáticas (CCS), que são as células de defesa do organismo, que mostram alterações quando há algo em desordem. Já a mastite ambiental, é causada por microorganismos oportunistas que estão presentes no ambiente de ordenha e curral, na água contaminada, no chão, fezes e em materiais orgânicos usados como cama para os animais. A contaminação ocorre durante a ordenha, pelas mãos dos operadores e até mesmo pelo uso de materiais infectados sem devida esterilização. Os principais agentes isolados da mastite subclínica e ambiental são: Staphylococcus aureus, Staphylococcus coagulase negativa, Streptococcus agalactiae, Enterococcus faecalis e Escherichia coli. O objetivo do presente trabalho de revisão foi descrever e apresentar a importância do uso da técnica de “Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus - Polymerase Chain Reaction” (ERIC-PCR), como uma alternativa viável, rápida e precisa para uso no diagnóstico da mastite bovina, com base em evidências científicas. Foi conduzida uma análise minuciosa de artigos encontrados em bancos de dados amplamente reconhecidos pela comunidade científica, apresentando resultados efetivos do uso da técnica para caracterização rápida das estirpes bacterianas em outros trabalhos. Desse modo, dando respaldo e incentivando novos estudos e publicações acerca da aplicação desta técnica no contexto da mastite bovina, tendo em vista, que é uma técnica muito utilizada para identificação bacteriana em outros casos. O método aplicado no trabalho foi uma revisão bibliográfica narrativa, apresentando também alguns elementos de uma revisão sistemática integrativa, pois foi auxiliada por ferramentas de cienciometria, que incluiu a busca de artigos em bases de dados científicos, como PubMed e Web Of Science, acerca da técnica, os seus benefícios e usos, especialmente na investigação de estirpes bacterianas, além de contribuições no desenvolvimento de novas técnicas de diagnóstico e controle da doença, ou, utilização da técnica de ERIC-PCR para identificação bacteriana em mastite bovina. Ainda que sejam necessárias pesquisas adicionais em campo e o desenvolvimento de novos trabalhos acerca do tema abordado, visando a comprovação dos resultados encontrados, espera-se que este trabalho possa tornar mais clara a importância do uso da técnica de ERIC-PCR no diagnóstico da mastite bovina, por conta da agilidade, segurança e precisão nos resultados - dando respaldo e incentivando novos estudos e publicações acerca da aplicação desta técnica no contexto desta e de outras doenças, tendo em vista que um rápido diagnóstico favorece a cura. A técnica de ERIC-PCR teve seus primeiros relatos publicados em 1992, tendo sido abordada em milhares de publicações. Esta, demonstra-se uma técnica precisa, viável e de baixo custo para sua execução, demonstrando resultados na diferenciação genômica de isolados em pesquisas clínicas, veterinárias e no controle de qualidade de produtos de origem animal. Nesta revisão, foi possível concluir que, ainda são necessárias pesquisas mais especificamente referentes à aplicabilidade da técnica em questão no diagnóstico da mastite bovina, tendo em vista os inúmeros trabalhos publicados, que demonstram sua eficácia em diversas outras áreas.
Abstract: Bovine mastitis is an inflammation of the mammary gland, caused mainly by bacteria, which affects dairy cows, causing damage to the mammary tissue, the producer, and the bovine milk and even causing public health problems. Bovine mastitis has been identified as one of the main causes of low bovine milk production in dairy cattle, leading to increased veterinary expenses, early disposal of milk, and disposal of the animal, depending on the level of infection; resulting in a high rate of economic losses in the dairy industry. It can be classified according to its forms of presentation in the animal, clinical or subclinical, and environmental. In the clinical form, physical symptoms are notable, whether in the animal's fourth mammary gland or the milk; The subclinical form, on the other hand, presents itself with the absence of visual changes in the mammary gland, which can aggravate the animal's condition easier, since it presents itself in this silent form, to identify subclinical mastitis, it ends up being necessary to collect samples for culturing microorganisms or counting somatic cells (SCC), which are the body's defense cells, which show changes when there is something in disorder. Environmental mastitis, on the other hand, is caused by opportunistic microorganisms that are present in the milking and corral environment, in contaminated water, on the floor, in feces, and organic materials used as bedding for animals. Contamination occurs during milking, through the hands of operators, and even through the use of infected materials without proper sterilization. The main isolated agents of subclinical and environmental mastitis are Staphylococcus aureus, coagulase-negative Staphylococcus, Streptococcus agalactiae, Enterococcus faecalis, and Escherichia coli. The objective of this review work was to describe and present the importance of using the “Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus - Polymerase Chain Reaction” (ERIC-PCR) technique, as a viable, fast, and accurate alternative for use in the diagnosis of bovine mastitis, based on scientific evidence. A thorough analysis of articles found in databases widely recognized by the scientific community was conducted, presenting effective results from using the technique to rapidly characterize bacterial strains in other works. Thus, supporting and encouraging new studies and publications on the application of this technique in the context of bovine mastitis, considering that it is a technique widely used for bacterial identification in other cases. The method applied in work was a narrative bibliographic review, also presenting some elements of an integrative systematic review, as it was aided by scientometric tools, which included the search for articles in scientific databases, such as PubMed and Web Of Science, about the technique, its benefits, and uses, especially in the investigation of bacterial strains, in addition to contributions to the development of new techniques for diagnosing and controlling the disease, or, using the ERIC-PCR technique for bacterial identification in bovine mastitis. Although additional research in the field and the development of new work on the topic addressed are necessary, aiming to confirm the results found, it is hoped that this work can make clearer the importance of using the ERIC-PCR technique in the diagnosis of bovine mastitis, due to the agility, safety, and precision of the results - supporting and encouraging new studies and publications on the application of this technique in the context of this and other diseases, bearing in mind that a rapid diagnosis favors a cure. The ERIC-PCR technique had its first reports published in 1992, having been covered in thousands of publications. This proves to be a precise, viable, and low-cost technique for its implementation, demonstrating results in the genomic differentiation of isolates in clinical and veterinary research and the quality control of products of animal origin. In this review, it was possible to conclude that more specific research is still needed regarding the applicability of the technique in question in the diagnosis of bovine mastitis, given the numerous published works, which demonstrate its effectiveness in several other areas.
URI: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/34215
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