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http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/23911| Título: | Isolamento e caracterização molecular de Bacillus thuringiensis (Bt) na região oeste do Paraná |
| Título(s) alternativo(s): | Isolation and molecular characterization of Bacillus thuringiensis (Bt) in western Paraná |
| Autor(es): | Pazdiora, Sabrina Laís |
| Orientador(es): | Maniglia, Thiago Cintra |
| Palavras-chave: | Bactérias esporíferas Inseticidas Biologia molecular Bacteria, Sporeforming Insecticides Molecular biology |
| Data do documento: | 28-Nov-2019 |
| Editor: | Universidade Tecnológica Federal do Paraná |
| Câmpus: | Toledo |
| Citação: | PAZDIORA, Sabrina Laís. Isolamento e caracterização molecular de Bacillus thuringiensis (Bt) na região oeste do Paraná. 2019. Trabalho de Conclusão de Curso (Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Toledo, 2019. |
| Resumo: | A bactéria Bacillus thuringiensis (Bt), tem formato de bastonetes, é Gram-positiva e esporulante, podendo produzir um cristal anexo ao esporo com potencial toxicológico. Devido a este potencial é amplamente estudada para utilização como bioinseticida contra pragas agrícolas de ordem Lepidoptera, Coleóptera e Díptera, e pragas urbanas como o mosquito Aedes aegypti, até podendo ser utilizado seu DNA para desenvolver transgênicos. O que torna a busca por novos haplótipos constante. Nosso objetivo foi buscar novos isolados, realizando coletas de solo em áreas de cultivo convencional da região oeste do Paraná, em mata urbana e reserva legal. As amostras foram isoladas em meio nutritivo com ampicilina, as colônias caracterizadas morfologicamente, submeteu-se a extração do DNA, reação de PCR para os genes 16S, gyrB, cry1, 2, 3, 4, 10, 11. Para quantificação e confirmação de todos os resultados foi realizado eletroforese em gel de agarose, seguido por purificação com polietilenoglicol e enviado das amostras para sequenciamento por empresa terceirizada, quando o tamanho de banda encontrado foi o esperado. As sequências editadas foram comparadas com sequências do Gene Bank (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/) para identificação molecular. Os resultados do 16S e o gyrB confirmaram que 16 amostras podem ser Bacillus thuringienses e é possível que algumas amostras apresentem o gene cry4. |
| Abstract: | The bacterium Bacillus thuringiensis (Bt), gram-positive and sporulant wand shaped, which can produce an attached crystal to the spore with toxicological potential. Due to this potential and extensively studied for use as a bioinsecticide against agricultural praises of Lepidoptera, Coleoptera and Diptera, and urban praises such as the Aedes aegypti gnat, this DNA can be used to develop transgenics. What makes the search for new haplotypes constant. Our goal was to search for new isolates, performing soil collections in areas of conventional cultivation, urban forest and legal reserve in western Paraná. Samples were isolated in ampicillin nutrient medium, colonies morphologically characterized, DNA extraction, PCR reaction for 16S, gyrB, cry1, 2, 3, 4, 10, 11 genes. For quantification and confirmation of all results were performed electrophoresis in agarose gel, followed by purification with polyethylene glycol and sent to sequencing by a third-party, when the band size is found like expected. The sequences were edited and compared to the GenBank sequence (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/) for molecular identification. The 16S and gyrB results confirm that 16 isolates may be Bacillus thuringienses and it is possible that they may have the cry4 gene. |
| URI: | http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/23911 |
| Aparece nas coleções: | TD - Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia |
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