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http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/39680| Título: | Metodologia direta para derivatização de ácidos graxos em abelhas Apis mellifera Linnaeus, 1758 (Hymenoptera: Apidae) |
| Título(s) alternativo(s): | Direct Methodology for the Derivatization of Fatty Acids in Bees Apis mellifera Linnaeus, 1758 (Hymenoptera: Apidae) |
| Autor(es): | Candatten, Nathan Douglas |
| Orientador(es): | Montanher, Paula Fernandes |
| Palavras-chave: | Abelhas africanizadas Lipídios Extração (Química) Africanized honeybee Lipids Extraction (Chemistry) |
| Data do documento: | 15-Ago-2025 |
| Editor: | Universidade Tecnológica Federal do Paraná |
| Câmpus: | Dois Vizinhos |
| Citação: | CANDATTEN, Nathan Douglas. Metodologia direta para derivatização de ácidos graxos em abelhas Apis mellifera Linnaeus, 1758 (Hymenoptera: Apidae). 2025. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Dois Vizinhos, 2025. |
| Resumo: | Os lipídios nos organismos vivos estão envolvidos em funções metabólicas importantes. Há anos o estudo de ácidos graxos em abelhas cresce, com o propósito de entender a fisiologia, as atividades comportamentais, comunicação e nutrição, entre outras. A abelha Apis mellifera L. é uma das espécies mais estudadas, por sua importância econômica e ecológica. Assim, metodologias tradicionais são utilizadas para preparação e análise de ácidos graxos em amostras animais. O método Bligh e Dyer, e a técnica utilizando Soxhlet são as mais utilizadas, mas apresentam desvantagens, como a necessidade de uma grande quantidade de amostra e a decomposição térmica de compostos sensíveis à temperatura, no caso do Soxhlet. Sendo assim, este trabalho tem como objetivo a aplicação de uma metodologia direta para obter ésteres metílicos de amostras pequenas da espécie de abelha A. mellifera, em menor tempo e amostra. Para isso, com o Planejamento Fatorial Completo 22 foi avaliado a melhor combinação dos fatores tempo de reação básica (NaOH) e ácida (H2SO4) em amostras de abelhas operárias. Os dados obtidos foram analisados por Análise de Variância (ANOVA) e visualizados por meio de gráficos de superfície de resposta e de contorno, para determinar os parâmetros que apresentaram influência estatisticamente significativa nos ácidos graxos. Na condição mais promissora do estudo, amostras de abelhas operárias, zangões e rainhas foram preparadas tanto pelo método de derivatização direta de ácidos graxos quanto pelo método tradicional de Bligh & Dyer, seguido por uma etapa de derivatização. Posteriormente, os ésteres metílicos obtidos foram analisados por Cromatografia Gasosa acoplada ao detector de Ionização de Chama (CG-DIC). Os resultados revelaram que o tratamento OP1, com tempo de reação 5 minutos para a etapa básica e 5 minutos para a ácida, mostrou-se principalmente eficiente para a análise de ácido oleico em abelhas. Em comparação ao método de Bligh & Dyer, o método direto demonstrou maior porcentagem relativa de ácido oleico em rainhas (81,81%), operárias (83,45%) e zangões (85,27%). Além disso, mostrou-se eficiente para o ácido mirístico em rainhas (1,34%), operárias (1,93%) e zangões (1,99%), e para o ácido láurico em operárias (0,58%) e zangões (0,31%). Desta forma, o método direto, com seu tempo total de 10 minutos, comprovou sua eficácia para determinação da abundância dos ácidos oleico, mirístico e láurico. Adicionalmente à sua eficiência nesse perfil lipídico, é uma metodologia simplificada e rápida, ideal para ser adotada em rotinas de laboratório para a análise do perfil de ácidos graxos em abelhas. |
| Abstract: | Lipids in living organisms are involved in important metabolic functions. For years, the study of fatty acids in bees has been growing, with the aim of understanding physiology, behavioral activities, communication, and nutrition, among other things. The honeybee Apis mellifera L. is one of the most studied species, due to its economic and ecological importance. Traditional methodologies are used for the preparation and analysis of fatty acids in animal samples. The Bligh and Dyer method and the Soxhlet technique are the most widely used, but they have disadvantages, such as the need for a large sample size and the thermal decomposition of temperature-sensitive compounds in the case of Soxhlet. Therefore, this study aims to apply a direct methodology to obtain methyl esters from small samples of the bee species A. mellifera, in less time and with fewer samples. To this end, Complete Factorial Design 22 was used to evaluate the best combination of basic (NaOH) and acid (H2SO4) reaction time factors in samples of worker bees. The data obtained were analyzed by Analysis of Variance (ANOVA) and visualized using response surface and contour graphs to determine the parameters that had a statistically significant influence on fatty acids. In the most promising condition of the study, samples of worker bees, drones, and queens were prepared using both the direct fatty acid derivatization method and the traditional Bligh & Dyer method, followed by a derivatization step. Subsequently, the methyl esters obtained were analyzed by gas chromatography coupled with a flame ionization detector (GC-FID). The results revealed that the OP1 treatment, with a reaction time of 5 minutes for the basic stage and 5 minutes for the acid stage, proved to be particularly efficient for the analysis of oleic acid in bees. Compared to the Bligh & Dyer method, the direct method showed a higher relative percentage of oleic acid in queens (81.81%), workers (83.45%), and drones (85.27%). In addition, it proved to be efficient for myristic acid in queens (1.34%), workers (1.93%), and drones (1.99%), and for lauric acid in workers (0.58%) and drones (0.31%). Thus, the direct method, with a total time of 10 minutes, proved its effectiveness for determining the abundance of oleic, myristic, and lauric acids. In addition to its efficiency in this lipid profile, it is a simplified and rapid methodology, ideal for adoption in laboratory routines for the analysis of the fatty acid profile in bees. |
| URI: | http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/39680 |
| Aparece nas coleções: | DV - Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia |
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