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Título: Transformação genética e clonagem na UTFPR - Ponta Grossa
Título(s) alternativo(s): Transformation and cloning techniques at UTFPR - Ponta Grossa
Autor(es): Prestes, João Pedro Valcazara
Orientador(es): Bittencourt, Juliana Vitoria Messias
Palavras-chave: Engenharia genética
DNA recombinante
Clonagem
Genetic engineering
Recombinant DNA
Cloning
Data do documento: 3-Jun-2024
Editor: Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Câmpus: Ponta Grossa
Citação: PRESTES, João Pedro Valcazara. Transformação genética e clonagem na UTFPR - Ponta Grossa. 2024. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, 2024.
Resumo: A engenharia genética é uma abordagem que utiliza a manipulação do DNA para projetar sistemas biológicos personalizados. Nesse contexto, a tecnologia do DNA recombinante desempenha um papel fundamental, permitindo a modificação e introdução de novas características em organismos vivos. No entanto, sua aplicação ainda é restrita na Universidade Tecnológica Federal do Paraná (UTFPR) campus Ponta Grossa. Nesse sentido, este trabalho tem como objetivo geral padronizar o processo de transformação e clonagem em linhagens de Escherichia coli, utilizando o método de indução de competência química via solução contendo Polietileno Glicol 8000, Sulfato de Magnésio, dimetilsulfóxido e a solução de cloreto de potássio, cloreto de magnésio e cloreto de cálcio chamada de KCM, a qual para a etapa de transformação utiliza somente a solução KCM. Além disso, avaliamos a indução de competência utilizando cloreto de cálcio, que exige um posterior choque térmico para a etapa de transformação. Como resultado, obtivemos sucesso utilizando exclusivamente a técnica de indução por cloreto de cálcio e posterior choque térmico. Através desse trabalho, buscase contribuir para o avanço da pesquisa e formação acadêmica na UTFPR, promovendo o desenvolvimento de soluções biotecnológicas cada vez mais avançadas e eficientes.
Abstract: Genetic engineering is an approach that utilizes DNA manipulation to design customized biological systems. In this context, recombinant DNA technology plays a key role, enabling the modification and introduction of new traits into living organisms. However, its application is still restricted at the Federal Technological University of Paraná (UTFPR) Ponta Grossa campus. Therefore, this work aims to standardize the transformation and cloning process in Escherichia coli strains, using the method of inducing chemical competence via a solution containing Polyethylene Glycol 8000, Magnesium Sulfate, dimethyl sulfoxide, and the solution of potassium chloride, magnesium chloride, and calcium chloride called KCM, which for the transformation stage uses only the KCM solution. Additionally, we evaluated competence induction using calcium chloride, which requires subsequent heat shock for the transformation stage. As a result, we successfully achieved transformation exclusively using the calcium chloride induction technique followed by heat shock. Through this work, we aim to contribute to the advancement of research and academic formation at UTFPR, promoting the development of increasingly advanced and efficient biotechnological solutions.
URI: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/37649
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