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Título: Isolamento e caracterização de microrganismos do solo degradadores de polietileno
Título(s) alternativo(s): Isolation and characterization of soil microorganisms degraders of polyethylene
Autor(es): Saggin, Luisa Francisco
Orientador(es): Busso, Cleverson
Palavras-chave: Polímeros
Solos
Biodegradação
Polymers
Soils
Biodegradation
Data do documento: 30-Set-2024
Editor: Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Câmpus: Toledo
Citação: SAGGIN, Luisa Francisco. Isolamento e caracterização de microrganismos do solo degradadores de polietileno. 2024. Dissertação (Mestrado em Processos Químicos e Biotecnológicos) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Toledo, 2024.
Resumo: O polietileno é um dos materiais plásticos com maior produção comercial. Na sua família, o PEBD (Polietileno de baixa densidade), representa 60% da produção total de sacolas plásticas, principal componente dos resíduos sólidos urbanos. Tendo em vista o exposto, e a esses materiais possuírem um tempo de longa vida extenso, o trabalho busca encontrar possíveis degradadores e rastrear isolados bacterianos indígenas com potencial de quebrar essas moléculas, através estado do Paraná. O processo para o isolamento de microrganismos, iniciou-se por meio da seleção de um ponto de coleta em relação ao tempo de exposição do solo, com os materiais despejados. Em seguida, no laboratório, realizou-se uma diluição seriada em solução salina 0,9% (p/v), seguida de um Pour plate. Por conseguinte, as colônias foram aplicadas em Meio Mínimo, contendo 1 g de Polietileno em pó. Após o crescimento das amostra, os meios foram corados com mistura de 0,1% (p/v) Azul de Comassie R-250, 40% (v/v) de metanol e 10% (v/v) de Ácido acético, obtendo-se três possíveis degradadores: A.R.B, B.D.A e T.B.I que apresentaram halos no entorno de suas colônias, fator positivo a degradação de polietileno. Por meio de uma segunda metodologia, utilizando-se de meio líquido mineral e pedaços de PEBD (2 cm), as 3 amostras foram expostas a um processo de estudo, novamente quanto a suas degradações, no qual através de análises no FTIR, buscou-se observar mudanças conformacionais em suas estruturas químicas, através do aparecimento de bandas características. Por fim, realizou-se uma coloração de gram nas amostras dos isolados positivos e logo em seguida, foi realizado o sequenciamento das estruturas do DNA amplificado, no qual determinou-se a espécie dos organismos positivos a degradação, no qual podem ser designados por: Paenibacillus alvei para B.D.A e Rhodanobacter spathiphyilli para A.R.B. Quanto a amostra T.B.I, durante o sequenciamento denotou-se, o aparecimento de duas bandas de leitura, inferindo um consórcio de dois microrganismos, para análise e comprovação do observado foi necessário realizar um isolamento da amostra, no qual identificou-se o crescimento conjunto de duas espécies distintas. Com os resultados obtidos, este trabalho destaca que os isolados bacterianos encontrados, podem contribuir ativamente para a biodegradção de polietileno e serem uma opção para esse processo degradativo.
Abstract: Polyethylene is one of the plastic materials with the highest commercial production. In its family, LDPE (low density polyethylene) represents 60% of the total production of plastic bags, the main component of municipal solid waste. Considering the above, and these materials have a long life time extended, the work seeks to find possible degraders and track indigenous bacterial isolates with potential to break down these molecules through the state of Paran´ a. The process for the isolation of microorganisms, was started by selecting a collection point in relation to the time of exposure of the soil, with the materials poured. Then, in the laboratory, a serial dilution was carried out in saline 0.9% (w/v), followed by a Pour plate. Therefore, the colonies were applied in Minimum Medium, containing 1 g of polyethylene powder. After sample growth, the media were stained with a mixture of 0.1% (w/v) Comassie R-250 Blue, 40% (v/v) methanol and 10% (v/v) acetic acid, obtaining three possible degraders: A.R.B, B.D.A and T.B.I that presented halos in the environment of their colonies, positive factor to the degradation of polyethylene. By a second methodology, using mineral liquid medium and pieces of LDPE (2 cm), the 3 samples were exposed to a study process, again regarding their degradations, in which through analysis in the FTIR, we sought to observe conformational changes in their chemical structures, through the appearance of characteristic bands. Finally, a gram staining was performed in the samples of positive isolates and soon after, the sequencing of amplified DNA structures was carried out, in which the species of the positive organisms to degradation was determined, in which they can be designated as: Paenibacillus alvei for B.D.A and Rhodanobacter spathiphyilli for A.R.B. As for the sample T.B.I, during sequencing it was noted that two reading bands appeared, inferring a cons´orcio of two microorganisms, for analysis and verification of the observed was necessary to perform an isolation of the sample, in which it was identified the joint growth of two distinct species. With the results obtained, this work highlights that bacterial isolates found, can actively contribute to the biodegradation of polyethylene and be an option for this degradative process.
URI: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/35562
Aparece nas coleções:TD - Programa de Pós-Graduação em Processos Químicos e Biotecnológicos

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