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http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/34304| Título: | Screening e identificação molecular de microrganismos endofíticos produtores de triterpenos em Quillaja lancifolia D. Don |
| Título(s) alternativo(s): | Screening and molecular identification of triterpene-producing endophytic microorganisms on Quillaja lancifolia D. Don |
| Autor(es): | Antonelo, Fábio Antônio |
| Orientador(es): | Perseguini, Juliana Morini Küpper Cardoso |
| Palavras-chave: | Saponinas Sequenciamento de nucleotídeo Fitoquímicos Saponins Nucleotide sequence Phytochemicals |
| Data do documento: | 22-Fev-2024 |
| Editor: | Universidade Tecnológica Federal do Paraná |
| Câmpus: | Dois Vizinhos |
| Citação: | ANTONELO, Fábio Antônio. Screening e identificação molecular de microrganismos endofíticos produtores de tripertenos em Quillaja lancifolia D. Don. 2024. Monografia (Especialização em Biologia Molecular) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Dois Vizinhos, 2024. |
| Resumo: | Saponinas são compostos bioativos de interesse para diversas indústrias devido às suas propriedades únicas de adjuvância em vacinas, atividades surfactantes, anti-inflamatórias e anticancerígenas. As saponinas triterpênicas das espécies pertencentes ao gênero Quillaja prolongam e intensificam respostas imunes humorais e celulares quando adicionadas em vacinas humanas e veterinárias, criando uma demanda crescente por fontes mais produtivas, sustentáveis e escalonáveis para tais compostos. In planta, por sua vez, os endófitos são microrganismos que habitam o interior de tecidos vegetais sem causar patologias em condições de homeostasia, podendo ser responsáveis pela modulação fisiológica sob condições de estresse e pela elicitação química - quando vias metabólicas especializadas são co-expressas entre endófito e planta hospedeira. Aqui, foram realizados o screening e a identificação molecular de microrganismos produtores de saponinas triterpênicas de Q. lancifolia, com o objetivo de contribuir para o reconhecimento de novas fontes produtoras e ampliar o conhecimento sobre a diversidade microbiana e bioquímica de endófitos. Um total de 42 cepas de microrganismos endofíticos (22 fungos e 20 bactérias) foram isolados de sementes, plântulas, calos e suspensões celulares de Q. lancifolia, sendo os mesmos testados para a produção de saponinas triterpênicas por meio de CCD 3 Cromatografia em Camada Delgada, teste de produção diferencial de espuma e determinação de rendimento de saponinas totais. Quatro cepas selecionadas e potencialmente produtoras de triterpenos (quatro fungos) foram identificadas molecularmente utilizando sequenciamento do Ácido Desoxirribonucleico (DNA) da região ITS-1, após amplificação por meio da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Diplodia sp., Acremonium sp., Fusarium sp. e Aureobasidium sp. foram identificados como endófitos produtores de saponinas triterpênicas em bandas coradas com anisaldeído sulfúrico na CCD, com rendimentos de saponinas de 3,0%, 0,74%, 0,40% e 6,28% (m/m), respectivamente, enquanto a planta apresentou 2,0%. Além da planta, culturas de endófitos de Q. lancifolia podem fornecer uma plataforma alternativa para a produção de saponinas triterpênicas, sendo as ferramentas de biologia molecular e de bioinformática indispensáveis para o processo de bioprospecção. |
| Abstract: | Saponins are bioactive compounds of interest to various industries due to their unique properties of adjuvancy in vaccines, surfactant activities, anti-inflammatory, and anticancer properties. The triterpenic saponins of species belonging to the genus Quillaja prolong and intensify humoral and cellular immune responses when added to human and veterinary vaccines, creating a growing demand for more productive, sustainable, and scalable sources for such compounds. In plants, endophytes are microorganisms that inhabit the interior of plant tissues without causing pathologies under homeostatic conditions, and they may be responsible for physiological modulation under stress conditions and chemical elicitation - when specialized metabolic pathways are co-expressed between endophyte and host plant. Here, screening and molecular identification of triterpenic saponin-producing microorganisms from Quillaja lancifolia were performed, aiming to contribute to the recognition of new producing sources and to expand knowledge on the microbial and biochemical diversity of endophytes. A total of 42 strains of endophytic microorganisms (22 fungi and 20 bacteria) were isolated from seeds, seedlings, calli, and cell suspensions of Q. lancifolia, and they were tested for triterpenic saponin production through TLC 3 Thin Layer Chromatography, foam differential production test, and determination of total saponins yield. Four selected strains potentially producing triterpenes (four fungi) were molecularly identified using sequencing of the DNA from the ITS- 1 region, after amplification through the Polymerase Chain Reaction (PCR) technique. Diplodia sp., Acremonium sp., Fusarium sp., and Aureobasidium sp. were identified as triterpenic saponin-producing endophytes in bands stained with sulfuric anisaldehyde in TLC, with saponin yields of 3.0%, 0.74%, 0.40%, and 6.28% (m/m), respectively, while the plant exhibited 2.0%. Besides the plant, cultures of Q. lancifolia endophytes can provide an alternative platform for the production of triterpenic saponins, with molecular biology and bioinformatics tools being indispensable for the bioprospecting process. |
| URI: | http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/34304 |
| Aparece nas coleções: | DV - Biologia molecular |
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