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http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/31418| Título: | Optimization and evaluation of the decellularization of a biohybrid material by supercritical CO2 treatment |
| Título(s) alternativo(s): | Optimização e avaliação do processo de descelularização de um material biohíbrido através de tratamento com CO2 supercrítico |
| Autor(es): | Wiele, Natan |
| Orientador(es): | Bittencourt, Juliana Vitoria Messias |
| Palavras-chave: | Transplante de orgãos, tecidos, etc Dióxido de carbono Células Regeneração (Biologia) Transplantation of organs, tissues, etc Carbon dioxide Cells Regeneration (Biology) |
| Data do documento: | 1-Dez-2022 |
| Editor: | Universidade Tecnológica Federal do Paraná |
| Câmpus: | Ponta Grossa |
| Citação: | WIELE, Natan. Optimization and evaluation of the decellularization of a biohybrid material by supercritical CO2 treatment. 2022. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Ponta Grossa, 2022. |
| Resumo: | Recentemente, a matriz extracelular descelularizada tem sido utilizada como provedora de importantes componentes quando usada como enxerto para recomposição celular em tecidos danificados após doenças isquêmicas do coração. Entre as diferentes técnicas de descelularização, os fluidos supercríticos estão sendo cada vez mais utilizados em tratamentos de tecidos vivos e sintéticos, oferecendo uma descelularização rápida e menos tóxica. O gás carbônico supercrítico é o candidato mais comum na substituição ou compensação do uso abrangente de detergentes tóxicos como o Sodium Dodecyl Sulfate (SDS), graças às suas propriedades de extração. No entanto, neste trabalho, o efeito sinergético de ambos SDS e CO2 supercrítico foi usado para descelularizar o material biohíbrido desenvolvido pelo Laboratory of Vascular Translational Science, o qual é revestido com gelatina para mimetizar a matriz extracelular, com 14 e 7 dias de cultura celular (G14 e G7), para posterior uso como enxerto cardíaco. Após as análises realizadas em microscópio confocal dos biopolímeros marcados fluorescentemente após tratamentos, foi observada uma descelularização potenciada quando usados SDS 0,5% + scCO2 apenas no G14, tendo em vista a baixa quantidade de DNA encontrada no polímero. As quantificações de DNA foram realizadas nos líquidos de imersão (SDS) e nos biopolímeros após os tratamentos afim de verificar a quantidade de DNA que foi possível retirar com cada tratamento. Finalmente, a condição de SDS 0,5% + scCO2 apresentou um melhor efeito de descelularização em menos tempo e utilizando uma quantidade menor de solvente quando comparado com o processo padrão. |
| Abstract: | Recently, decellularized extracellular matrix (ECM) has been reported to provide important components to be used as a scaffold for cell delivery on damaged tissues after ischemic heart diseases. Among different decellularization techniques, the supercritical fluids are being increasingly used in living and synthetic tissues, offering a fast and less toxic decellularization process to further biological applications. The supercritical carbon dioxide is the most commonly candidate to replace or compensate the large use of toxic detergents like the Sodium Dodecyl Sulfate (SDS) due to its extraction properties. However, in this work, the synergetic effect between both SDS and supercritical CO2 was used to decellularize the biohybrid material developed by the Laboratory of Vascular Translational Science coated with gelatin to mimic the ECM and with 14 and 7 days (G14 and G7) of cell culture, for later use as a cardiac graft. After confocal analysis of the fluorescent labeled biopolymers after treatments, it was seen the potentialized decellularization effect of SDS 0.5% + scCO2 only in the G14 since almost no DNA was found. DNA quantifications were performed within the immersion liquid (SDS) and the biopolymers after treatment to check the amount of DNA that was managed to remove. Finally, this condition appeared to have a decellularization effect in a much shorter time span than the standard decellularization process and with a much smaller amount of solvent. |
| URI: | http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/31418 |
| Aparece nas coleções: | PG - Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia |
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