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http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/24680| Título: | Estabelecimento de banco de linhagens celulares aplicadas a pesquisa científica e ensaios toxicológicos in vitro |
| Título(s) alternativo(s): | Establishment of a bank of cell lines applied to scientific research and in vitro toxicological test |
| Autor(es): | Kuligovski, Crisciele |
| Orientador(es): | Setti, Joao Antonio Palma |
| Palavras-chave: | Cultura de células Controle de qualidade Micoplasma Microbiologia - Cultura e meios de cultura Células - Armazenamento Cell culture Quality control Mycoplasma Microbiology - Cultures and culture media Cells - Storage |
| Data do documento: | 18-Dez-2020 |
| Editor: | Universidade Tecnológica Federal do Paraná |
| Câmpus: | Curitiba |
| Citação: | KULIGOVSKI, Crisciele. Estabelecimento de banco de linhagens celulares aplicadas a pesquisa científica e ensaios toxicológicos in vitro. 2020. Dissertação (Mestrado em Engenharia Biomédica) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Curitiba, 2020. |
| Resumo: | O Instituto Carlos Chagas (ICC) é a unidade técnico-científica da FIOCRUZ que desenvolve pesquisa biomédica no Paraná. Dentre os diversos projetos de pesquisa e ensaios experimentais destacam-se aqueles que avaliam interação parasita-hospedeiro, produção de biomoléculas, ensaios de citotoxicidade incluindo o uso de métodos alternativos ao uso de animais, diferenciação de células-tronco, entre outros. Todas essas grandes áreas de conhecimento têm em comum o uso de cultivos celulares entre seus modelos de estudo. A fim de garantir a disponibilidade de cultivos celulares, treinamento de usuários e rastreabilidade do material biológico para os projetos de pesquisa, prestação de serviços e desenvolvimento tecnológico, o objetivo deste trabalho foi a implementação de um Banco de Linhagens Celulares do ICC – FIOCRUZ-PR seguindo um sistema de gestão e controle de qualidade. Para isso, foram aplicadas a ferramentas de gestão 5W2H e sistema 5S para fazer o diagnóstico inicial da estrutura e organização laboratorial e definir escopo de documentos e metodologias a serem implantadas. Seguiu-se a definição das linhagens celulares para estabelecimento dos Bancos de células Mestre e de trabalho de acordo com a demanda dos usuários. Foram estabelecidos bancos mestres e de trabalho para as linhagens celulares NHDF, V79-4, CHO K1, Balb/c 3T3, as quais foram submetidas aos ensaios de controle de qualidade, de viabilidade celular, teste para detecção de contaminação por micoplasma através da técnica Reação da Cadeia da Polimerase, coloração de DNA e por luminescência através de um kit comercial. Somente células com mais de 80% de viabilidade e que não apresentaram contaminação foram armazenadas no banco mestre e disponibilizadas aos pesquisadores através do banco de trabalho. Com esse trabalho foi possível rastrear as necessidades relativas à consolidação da estrutura laboratorial e documentação, elaborando e implementando o controle de procedimentos de segurança, treinamentos, registro e relatórios, entre outros documentos que garantam a rastreabilidade e confiabilidade dos dados. Desta forma, fortalecem-se os projetos de pesquisa e conferem maior reprodutibilidade aos resultados científicos. |
| Abstract: | He Carlos Chagas Institute (ICC) is the technical-scientific unit of FIOCRUZ that develops biomedical research in Paraná. The research projects developed at ICC include the evaluation of parasite-host interaction, production of biomolecules, cytotoxicity tests, development of alternative methods to the use of animals, stem cell differentiation, among others. All of these areas have in common the use of cell cultures among their study models. To guarantee the availability of cell cultures, user training, and traceability of biological material for research projects, services, and technological development, the objective of this work was the implementation of an ICC Cell Line Bank following a management and quality control system. For this, 5W2H management tools and 5S System were applied to make the initial diagnosis of the structure and laboratory organization and define the scope of documents and methodologies to be implemented. The definition of cell lines used to establish the cell banks were based on the demand of users. Master and work banks were established for the cell lines: NHDF, V79-4, CHO K1, Balb/c 3T3. All these cells were subjected to quality control tests, including cell viability assays and detection of mycoplasma contamination using the Polymerase Chain Reaction (PCR), DNA staining and a commercial kit. Only cell cultures with cell viability higher than 80% and negative for mycoplasma tests were stored in the master bank and made available to researchers through the work bank. This work enabled the identification of needs related to the consolidation of the laboratory structure and documentation, allowing the elaboration and implementation of the control of safety procedures, training, registration, and reports, among other documents that guarantee the traceability and reliability of the cell culture data. This quality controls strengthens the research projects and improve their reproducibility of scientific results. |
| URI: | http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/24680 |
| Aparece nas coleções: | CT - Programa de Pós-Graduação em Engenharia Biomédica |
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